甲型流感病毒H1N1滅活檢測(cè)
流感病毒分為甲、乙、丙、丁4型，人流感主要是甲型流感病毒和乙型流感病毒引起。甲流全名為甲型H1N1流感，是由甲型H1N1流感病毒引起的一種急性呼吸道傳染病。人群對(duì)甲型H1N1流感病毒普遍易感，并可以人傳染人。甲型流感每年呈季節(jié)性流行，易引起大流行。咨詢電話:13816144967(微信同號(hào))
臨床標(biāo)本的采集
采集對(duì)象:所有甲型流感( H1N1)疑似病例應(yīng)該采集上呼吸道標(biāo)本來檢測(cè)豬進(jìn)行H1N1病毒的相關(guān)檢測(cè)
采集種類:鼻咽拭子/吸取物或者鼻腔沖洗液/吸取物。如果不能收集這些標(biāo)本，可合并鼻拭子與口咽拭子。氣管插管的病人也應(yīng)收集氣管吸取物。標(biāo)本應(yīng)置于無菌病毒運(yùn)輸液(VTM)，并立即用冰塊或冰排保存或置于4 °C (冰箱)，并馬上運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室
采集器材要求
拭子:應(yīng)使用頭部為合成纖維的拭子(例如，聚酯纖維)，用鋁或塑料做桿。不推薦棉拭子和木桿。不能用海藻酸鈣做的拭子收集標(biāo)本。標(biāo)本采集管應(yīng)包含3毫升病毒運(yùn)輸液
采樣管:外螺旋口、耐一70°C凍存;
采樣液:含有蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑， 阻止細(xì)菌和真菌生長(zhǎng)的抗生素，緩沖液(可使用Hank's或Eagle's等培養(yǎng)液加入抗菌素和0.5%BSA)
標(biāo)準(zhǔn)的儲(chǔ)存和運(yùn)輸
臨床標(biāo)本儲(chǔ)存
所有呼吸道標(biāo)本應(yīng)保存在4°C，并盡快放置在-70°C。如果沒有-70°C度冰箱，標(biāo)本應(yīng)保存在4°C，但不應(yīng)超過4天
臨床標(biāo)本運(yùn)輸
應(yīng)按照A類包裝 要求進(jìn)行樣品的包裝，所有標(biāo)本應(yīng)標(biāo)示清楚。疑似病例標(biāo)本運(yùn)送應(yīng)包含的信息請(qǐng)參照禽流感標(biāo)本運(yùn)輸咨詢電話:13816144967(微信同號(hào))
檢測(cè)方法
1、首選Real-time RT-PCR方法檢測(cè)
2、快速流感抗原檢測(cè)
3、免疫熒光法
4、病毒分離
? 甲型流感病毒的快速抗原檢測(cè)可以用于檢測(cè)該豬流感病毒，但由于和其它檢測(cè)方法相比靈敏度較低，因此可能會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果。
? 由于免疫熒光和其他免疫檢測(cè)方法中使用的抗體可能不會(huì)和該病毒的靶位點(diǎn)結(jié)合，因此會(huì)產(chǎn)生假陰性結(jié)果。
? 雖然在PCR方法中檢測(cè)流感基因的高度保守片段和確診A型流感的引物也許還可以使用，但目前PCR診斷試驗(yàn)中用于甲型流感病毒分型的引物可能不能檢測(cè)非人類病毒。
? 確診豬流感病毒A/H1N1的唯一可靠的方法是進(jìn)行病毒分離(病毒分離應(yīng)在BSL-3實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行)，并且至少進(jìn)行部分基因測(cè)序。但陰性結(jié)果不能排除豬源流感病毒( A/H1N1)感染
1、流感快診檢測(cè)
區(qū)別甲、乙型流感病毒，乙型陽(yáng)性排除，全部陰性結(jié)果不能排除
2、RT-PCR檢測(cè)
針對(duì)豬源甲型流感病毒的特異性引物，人源甲型流感病毒弓|物不能有效地診斷豬源病毒感染
3、病毒分離
使用MDCK細(xì)胞、雞胚可有效分離豬源病毒，對(duì)目前不能鑒定的甲型流感病毒株必須上送鑒定，在進(jìn)行基因測(cè)序后可確定豬源病毒感染咨詢電話:13816144967(微信同號(hào))
檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)要求
生物安全防護(hù)原則
標(biāo)本的檢測(cè)、儲(chǔ)存、包裝和運(yùn)送應(yīng)按照《病原微生物室生物安全管理?xiàng)l例》( 國(guó)務(wù)院424號(hào)令)和《可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本運(yùn)輸管理規(guī)定》(中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部第45號(hào)令)等有關(guān)規(guī)定執(zhí)行
采集疑似感染A(H1N1)型豬流感病毒的患者臨床標(biāo)本、進(jìn)行標(biāo)本處理、包裝、診斷性檢測(cè)及進(jìn)行病毒分離的工作人員必須進(jìn)行嚴(yán)格的安全防護(hù)
所有的涉及病例標(biāo)本的實(shí)驗(yàn)操作(包括樣本的處理、包裝及包裝拆除)必須在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行;臨床標(biāo)本的實(shí)驗(yàn)活動(dòng)(病毒分離除外)必須在BSL-2實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行病毒分離、鑒定必須在BSL-3或更高一級(jí)的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行
實(shí)驗(yàn)室廢棄物處理原則
應(yīng)遵循所在機(jī)構(gòu)標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)程內(nèi)的所有廢棄物處置程序進(jìn)行121 °C、 30分鐘高壓滅菌處理(注意:外排式高壓滅菌器存在生物安全隱患)
化學(xué)消毒劑浸泡
有效的實(shí)驗(yàn)室使用的化學(xué)消毒劑
70%酒精
5%來蘇爾
10%漂白液
所有人員在工作期間均應(yīng)進(jìn)行自我癥狀監(jiān)測(cè)，一旦出現(xiàn)包括發(fā)熱、咳嗽、喉嚨痛、嘔吐、腹瀉、頭痛、流鼻涕和肌肉疼痛癥狀，應(yīng)立即報(bào)告。
如有人員在無防護(hù)情況下暴露于采集自A (H1N1)型豬流感確診病例的臨床物質(zhì)或活病毒，應(yīng)考慮在暴露后的7天時(shí)間里進(jìn)行抗病毒化學(xué)藥物預(yù)防。咨詢電話:13816144967(微信同號(hào))
